ANALIZA MIKROBIOTE ZBIRNEGA JEZERA VOD IZ NAPRAVE ZA ODSTRANJEVANJE TEKOČIH ODPADKOV IZ PROIZVODNJE TiO2Simon, Lučka (Avtor) Trček, Janja (Mentor) Odpadne vodeanaliza mikrobioteidentifikacija bakterij16S rRNApretočna citometrija.Na zbirnem jezeru odpadnih industrijskih vod iz naprave za odstranjevanje tekočih odpadkov iz proizvodnje TiO2, ki se nahaja v urbanem okolju, se v zimskih in spomladanskih mesecih opaža motnost vode. V prelivnih vodah iz jezera se občasno pojavijo povišane koncentracije železa. Zaradi pojava motnosti in občasnega penjenja površine jezera, smo z analizo mikrobiote v vzorcih vod želeli ugotoviti morebitne biološke vzroke za nastale pojave. Zato smo leta 2013, v zimskem času, odvzeli vzorce na petih vzorčnih mestih. Vzorcem smo ob odvzemu izmerili temperaturo in vrednost pH. V vsakem izmed petih vzorcev vode, odvzetih iz različnih mest jezera, smo z gojitveno tehniko na kompleksnem gojišču določili 2,8 x 102 do 5,9 x 103 CFU/mL. Iz vsakega vzorca smo izbrali fenotipsko različne kolonije in iz njih izolirali 35 morfološko različnih sevov, ki smo jih shranili na –80oC. Seve smo nato identificirali s fenotipskimi in molekularno-biološkimi pristopi. Fenotipska identifikacija je obsegala barvanje po Gramu in encimsko analizo (oksidazni in katalazni test). Od tega je bilo 83 % sevov po Gramu negativnih, 11 % pa pozitivnih. Na oksidazni test je bilo 75 % sevov pozitivnih, na katalazni test pa so bili vsi sevi pozitivni. V nadaljevanju smo seve identificirali na osnovi nukleotidnih zaporedij genov za 16S RNA. 19 izolatov smo identificirali kot predstavnike razreda -Proteobacteria, s prevladujočim rodom Aeromonas, 3 kot predstavnike razreda β-Proteobacteria z enim samom rodom Janthinobacterium, 2 kot predstavnika razreda α-Proteobacteria (Sphingomonas in Rhodobacter), 2 iz rodu Flavobacterium in 7 iz skupine po Gramu pozitivnih bakterij s prevladujočim rodom Bacillus. En sev je v laboratorijskih pogojih izgubil sposobnost namnoževanja, enega pa smo identificirali kot plesen Fusarium sp. Vzporedno štetje bakterij s pretočno citometrijo je pokazalo, da v laboratorijskih pogojih uspemo izolirati manjši delež bakterij glede na celotno število, ki se nahaja v jezeru ( 0,1 %). Prisotnost mikroorganizmov smo povezali s fizikalno-kemijskimi lastnostmi vzorcev. S pomočjo literature smo delno razložili vizualne spremembe na zbirnem jezeru. [L. Simon]20142014-09-18 07:57:10Diplomsko delo46247sl