Optimizacija in vitro stimulacije limfocitov s fitohemaglutininom (PHA) in lipopolisaharidi (LPS)Počivavšek, Patricija (Avtor) Potočnik, Uroš (Mentor) Krajnc, Gloria (Komentor) limfocitistimulacijapretočna citometrijaPHALPSoptimizacijaStimulacija limfocitov s fitohemaglutininom(PHA) in lipopolisaharidi(LPS) je ključna metoda za preučevanje imunskih odzivov v eksperimentalnih pogojih. Optimizacija koncentracij omenjenih imunostimulatorjev je bistvena za zagotavljanje fiziološko relevantnih in natančnih rezultatov. V diplomski nalogi smo preučevali odziv limfocitov na različne koncentracije PHA in LPS, ki inducirajo 70% maksimalnega odziva. Pri tem smo prav tako želeli ugotoviti, če najvišje koncentracije PHA in LPS povzročijo celično smrt. Limfocite smo izolirali iz mononuklearnih celic periferne krvi(PBMC) zdravih darovalcev in jih gojili v prisotnosti različnih koncentracij PHA in LPS. Proliferacijo celic smo merili s pomočjo barvila alamarBlue in določili celično viabilnost z uporabo pretočne citometrije. Rezultati so pokazali, da je PHA pri vmesni koncentraciji 1-2,5 μg/mL učinkovit stimulator za doseg 70% maksimalnega odziva limfocitov, hkrati pa najvišje koncentracije PHA povzročajo celično smrt. Nasprotno je bil LPS neuspešen zaradi velike variabilnosti med donorji. Naše ugotovitve prispevajo k boljši standardizaciji eksperimentalnih protokolov pri imunoloških raziskavah.[P. Počivavšek]20242024-08-01 21:45:19Diplomsko delo/naloga89663sl