Izolacija encimov in proteinov iz celic črne kvasovke Wallemia Ichthyophaga z uporabo mehanskega postopkaKresnik, Marko (Avtor) Leitgeb, Maja (Mentor) Čolnik, Maja (Komentor) W.Ichthyophagačrne glivehomogenizacijaencimiproteini.V svetu s hitro naraščajočo populacijo, onesnaženostjo in z izčrpanjem številnih naravnih virov, encimska tehnologija ponuja velik potencial za številne industrijske aplikacije. Nekatera področja, kjer se uporablja encimska tehnologija, so prehrambena industrija (encimi se uporabljajo za izboljšanje proizvodnje hrane, na primer pri predelavi žit, proizvodnji sladkorja, sira, sokov..), farmacevtska industrija (encimi se uporabljajo v sintezi zdravil, proizvodnji antibiotikov in pripravi cepiv), tekstilna industrija, proizvodnja biogoriv, kozmetična industrija in še druge panoge. Mikrobni encimi lahko na ekonomičen in okolju prijazen način delujejo kot biokatalizatorji za izvajanje reakcij v bioprocesih. Vsak živ organizem vsebuje biološko aktivne snovi, ki jih je mogoče ekstrahirati. Mikrobne celice proizvajajo intracelularne in ekstracelularne encime. Za sprostitev intracelularnih komponent iz celice je potrebno celično steno mikrobov razbiti. Za to smo uporabili postopek mehanske homogenizacije. Postopek homogeniziranja se običajno izvaja s pomočjo homogenizacijskih naprav, ki lahko delujejo s hidravličnim tlakom, ultrazvokom, visokim tlakom ali drugimi mehanskimi silami. V našem primeru bomo uporabili rotor-stator homogenizator, kjer vzorec potuje skozi ozek prostor med vrtečim rotorjem in statorjem, kar povzroči razbijanje delcev in razlitje celic v celično suspenzijo. Namen te diplomske naloge je bil ugotoviti kako čas homogenizacije vpliva na preživelost črnih kvasovk W.Ichthyophaga v celični suspenziji, preostalo aktivnost encimov (amilaza, β- glukozidaza, proteaza, celulaza) in preostalo koncentracijo proteinov. Celično suspenzijo smo homogenizirali v času od 0 – 90 min pri konstantni temperaturi 35 ºC. Rezultati so pokazali, da je preživelost W.Ichthyophaga s podaljševanjem časa homogenizacije upadala, preostala koncentracija proteinov pa je naraščala. Zaznali smo povečanje preostale aktivnosti encimov α-amilaze, celulaze in proteaze. Na preostalo aktivnost β-glukozidaze pa je imela homogenizacija negativen vpliv, saj smo dokazali takojšen upad preostale aktivnosti.[M. Kresnik]20252025-03-25 18:57:51Diplomsko delo/naloga92254sl