Preučevanje mehanizma oksidacije pomožnih snovi v proteinskih formulacijahMatves, Sanja (Avtor) Zalar, Matja (Mentor) Fermišek, Miha (Komentor) pomožne snovihistidinkovinsko katalizirana oksidacijaNMR spektroskopijanamizni NMR spektrometerPomožne snovi imajo v farmaciji ključno vlogo pri zagotavljanju stabilnosti, varnosti in ustrezne oblike končnega zdravila. Ena izmed pogostejših pomožnih snovi je aminokislina histidin, ki se uporablja kot pomembna puferska pomožna snov za stabilizacijo bioloških zdravil. Vendar pa lahko prisotnost sledov prehodnih kovinskih ionov v formulaciji povzroči kovinsko katalizirano oksidacijo histidina, kar vodi do degradacije pufra in posledično agregacije zdravilne učinkovine. V diplomskem delu smo s pomočjo jedrske magnetne resonance (NMR) preučevali kinetiko oksidacije histidina ter primerjali katalitični vpliv železovih, bakrovih in nikljevih ionov (Fe(II), Cu(II), Ni(II)) ter kontrolnega vzorca brez dodanih kovin v raztopini 50 mM histidina in 0,2 M vodikovega peroksida pri vrednosti pH 6. S spremljanjem časovne spremembe integriranih površin NMR signalov za protona Hε in Hδ na imidazolnem obroču histidina smo ocenili konstante reakcijskih hitrosti za posamezne kovine. Analiza NMR spektrov je razkrila izrazite razlike v kinetiki oksidacije v odvisnosti od uporabljene kovine. Prisotnost železovih ionov je pospešila oksidativno razgradnjo imidazolnega obroča, medtem ko je le-ta v prisotnosti Cu(II) potekala bistveno počasneje. Ioni Ni(II) so se izkazali za redoks neaktivne, saj v izbranem časovnem okviru oksidativna razgradnja histidina ni potekla. Ugotovili smo, da je stabilnost histidina kot pomožne snovi močno odvisna od prisotnosti prehodnih kovin, kar je ključnega pomena pri zagotavljanju varnosti in stabilnosti zdravilne učinkovine. Poznavanje kinetike razgradnje omogoča natančnejše napovedovanje roka uporabnosti proteinskih formulacij ter utemeljuje potrebo po strogi kontroli kovinskih nečistoč v proizvodnih procesih in v produktih.20262026-08-19 22:46:58Diplomsko delo/naloga99564sl