20.500.12556/DKUM-36712 UPORABA SUPERKRITIČNEGA OGLIKOVEGA DIOKSIDA (SC CO 2 ) ZA IZOLACIJO ENCIMOV IN PROTEINOV IZ CELIC ČRNE KVASOVKE TRIMMATOSTROMA SALINUM USE OF SUPERCRITICAL CARBON DIOXIDE (SC CO 2 ) FOR ISOLATION OF ENZYMES AND PROTEINS FROM BLACK YEAST TRIMMATOSTROMA SALINUM Namen diplomske naloge je določiti vpliv superkritičnega ogljikovega dioksida (SC CO2) na preživetje črnih kvasovk Trimmatostroma salinum in izločanje proteinov in nukleinskih kislin iz celične suspenzije T. salinum. Suspenzijo s kulturo T. salinum smo v visokotlačnem šaržnem reaktorju izpostavili SC CO2 pri tlaku 100 bar in 35 °C. Rezultati so pokazali, da se je s podaljševanjem časa inkubacije v SC CO2 preživelost celic T. salinum zmanjševala. Merili smo tudi aktivnost encimov celulaze, α-amilaze, β-glukozidaze in proteaze ter koncentracije proteinov in nukleinskih kislin v odvisnosti od inkubacijskega časa v SC CO2. T. salinum vsebuje ekstracelularne in intracelularne encime. Z inkubacijo celične suspenzije T. salinum v SC CO2 smo dosegli, da so se iz celic T. salinum izločili še intracelularni encimi. Tako se je posledično povečala koncentracija skupnih proteinov v suspenziji po inkubaciji v SC CO2. S podaljševanjem inkubacijskega časa celične suspenzije T. salinum v SC CO2 je padala aktivnost ekstracelularnim encimom, medtem ko se je aktivnost intracelularnih encimov v celični suspenziji T. salinum zviševala. Predvidevamo, da je SC CO2 povzročil denaturacijo encimov. The purpose of the diploma thesis is to examine how the survival of black yeast Trimmatostroma salinum and secretion of proteins and nucleic acids are affected during exposure to supercritical carbon dioxide (SC CO2). The suspension of T. salinum was exposed to SC CO2 on high pressure batch reactor at 100 bar and at 35 °C. The results showed that the survival of T. salinum cells decreased with prolongation of incubation time in SC CO2. The activity of cellulose, α-amylose, β-glucosidase and protease in dependence of incubation time in SC CO2 was measured as well as the concentration of proteins and nucleic acids. T. salinum contains extracellular and intracellular proteins. During the incubation of T. salinum suspension in SC CO2, intracellular proteins were secreted. Therefore the total protein concentration in T. salinum suspension increased. With the increase in incubation time in SC CO2 the activity of extracellular enzymes in T. salinum cell suspension was reduced. We anticipate that the denaturation of enzymes was caused by SC CO2. SC CO2 T. salinum celulaza β-glukozidaza proteini α-amilaza SC CO2 T. salinum cellulase proteins α-amylase β-glucosidase true true false [M. Bosilj] Slovenski jezik Angleški jezik Diplomsko delo/naloga 2012-06-21 21:15:26 2012-06-26 08:48:58 2022-04-21 14:24:33 2024-01-01 03:35:04 2012 0 Maribor 0 0000-00-00 NiDoloceno NiDoloceno NiDoloceno 0000-00-00 0000-00-00 0000-00-00 66-987:[543.645.4.054+543.384.054](043.2) 16697110 URN:SI:UM:DK:RRJ2S5SK VS_Bosilj_Monika_2012.pdf VS_Bosilj_Monika_2012.pdf 1 AEE1D7FF1FE40B529C119F6BB608D430 32a4e7577ccb1f46e07d764497cc51c697531896d86cf4709fcf71ff6c673356 1cdaff4b-7c08-11eb-bb7a-00155d0001ca 20.500.12556/dkum/17dd54fc-61b7-4f04-b8d5-1851054fd021 https://dk.um.si/Dokument.php?lang=slv&id=47979 Fakulteta za kemijo in kemijsko tehnologijo 0 0 0