| Title: | IZOLACIJA - REKOMBINANTNEGA FLAGELINA |
|---|
| Authors: | ID Bremšak, Robert (Author)
ID Potočnik, Uroš (Mentor) More about this mentor... 
ID Ivičak-Kocjan, Karolina (Comentor) |
|---|
| Files: |  VS_Bremsak_Robert_2016.pdf (2,12 MB)
MD5: C6D0DEC4042AC36A2CC8FD4196B28026
|
|---|
| Language: | Slovenian |
|---|
| Work type: | Bachelor thesis/paper |
|---|
| Typology: | 2.11 - Undergraduate Thesis |
|---|
| Organization: | FKKT - Faculty of Chemistry and Chemical Engineering
|
|---|
| Abstract: | Tollu-podobni receptorji (ang. Toll-like receptors oz. TLRs) so transmembranski receptorji tipa I, sestavljeni iz ektodomene, transmembranske domene in znotrajcelične signalne domene TIR (ang. Toll/interleukin-1 receptor domain). TLR-ji prepoznavajo molekulske vzorce, značilne za mikroorganizme in endogene signale nevarnosti, ki sprožijo imunski odgovor, ki vključuje vnetje in produkcijo citokinov. Toll-u podobni receptor 5 oz. TLR5 prepoznava flagelin, ki je glavna sestavina bakterijskih bičkov in virulenčni dejavnik številnih po Gramu pozitivnih in po Gramu negativnih bakterij. Prepoznavanje flagelina je evolucijsko ohranjen mehanizem. Flagelin je sestavljen iz štirih domen, imenovanih D0-D3. Domeni D0 in D1 sta pomembni za aktivacijo TLR5 in sta med različnimi vrstami bakterij zelo ohranjeni, medtem ko sta domeni D2 in D3 pomembni za protitelesni odziv in predstavljata ti. hipervariabilno regijo.
Namen diplomskega dela je bil izolirati in karakterizirati rekombinantni protein dimSF57, ki je sestavljen iz 2 kratkih flagelinov bakterije S. tryphiumrium povezanih med sabo s 57 aminokislinami dolgim peptidnim linkerjem. Kratek flagelin je sestavljen iz N-končnega dela flagelina (2-176 AK) in C-končnega dela flagelina (398-494 AK). Pri diplomskem delu smo uspešno izolirali in očistili rekombinanten flagelin z uporabo Ni-kelatne kromatografije in velikostno izključitvene kromatografije. Z metodo cirkularnega dikroizma smo pokazali, da je izoliran rekombinantni protein ustrezno zvit in zavzame sekundarno strukturo α-vijačnice. Z metodo dinamičnega sipanja svetlobe smo v raztopini vzorca pokazali delce velikosti 7,8 nm. |
|---|
| Keywords: | TLR, TLR5, flagelin, dimSF57, rekombinantni protein |
|---|
| Place of publishing: | Maribor |
|---|
| Publisher: | [R. Bremšak] |
|---|
| Year of publishing: | 2016 |
|---|
| PID: | 20.500.12556/DKUM-63605 |
|---|
| UDC: | 543.384:543.544.1(043.2) |
|---|
| COBISS.SI-ID: | 20324886 |
|---|
| NUK URN: | URN:SI:UM:DK:QAWOMIY9 |
|---|
| Publication date in DKUM: | 14.10.2016 |
|---|
| Views: | 2496 |
|---|
| Downloads: | 69 |
|---|
| Metadata: |    |
|---|
| Categories: | KTFMB - FKKT
|
|---|
|
:
|
Copy citation |
|---|
| | | | Average score: | (0 votes) |
|---|
| Your score: | Voting is allowed only for logged in users. |
|---|
| Share: |  |
|---|
Hover the mouse pointer over a document title to show the abstract or click
on the title to get all document metadata. |
